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技術(shù)文章/ article
方法一:依據(jù)GBT21317-2007
1. 前處理(以牛肉為例)取已經(jīng)勻漿好的牛肉5g(到0.01g),置于50ml離心管中,加入50ul,10ppm的混標(biāo),保證每kg肉中含1mg標(biāo)樣。分別加入20ml、20ml、10ml 0.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液冰水浴中超聲10min后取出,3000r/min下離心5min,合并上清液,定容至50ml,離心,取上清液,混勻,待凈化。Mallvaine緩沖液配制:將500ml 0.1mol/L 檸檬酸溶液與312.5 ml 0.2mol/L 磷酸氫二納溶液混合,NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至4.0+/- 0.050.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液配制:稱取30.25g乙二胺四乙酸二鈉放入812.5 ml Mallvaine緩沖液中,使其溶解,混勻。 固相萃取小柱:InertSep Pharma (3ml/60mg或6ml/500mg)WondaSep HLB 3ml/60mg均可 SPE方法:活化/平衡:5ml甲醇、5ml水上樣:50ml待測液中準(zhǔn)確取10ml過柱清洗:5ml水、5ml甲醇:水=1:19小柱脫水干燥洗脫:10ml甲醇:乙酸乙酯=1:9將洗脫液氮吹至干,用流動(dòng)相定容至1ml,過濾,待測。2. 色譜分析色譜柱:InertSustain C18 5um 4.6*250mm流動(dòng)相:乙腈:甲醇:0.01%草酸溶液=2:1:7流速:1.0ml/min柱溫:25℃進(jìn)樣量:60 ul檢測波長:350nm儀器:Shimadzu LC-20A3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果基質(zhì)加標(biāo)濃度為 1mg/kg,3次平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
名稱
空白加標(biāo)
基質(zhì)加標(biāo)
回收率
回收率RSD
土霉素
98.63%
7.5%
85.19%
2.2%
四環(huán)素
100.96%
8.4%
95.73%
5.8%
金霉素
91.05%
6.6%
98.11%
8.1%
代表圖譜
4. 結(jié)論在此實(shí)驗(yàn)條件下,采用固相萃取小柱InertSep Pharma對牛肉中四環(huán)素、土霉素、金霉素進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn),回收率*要求。
方法二:島津技邇改進(jìn)的方法
1. 前處理(以牛肉為例)取已經(jīng)勻漿好的牛肉5g(到0.01g),置于50ml離心管中,加入50ul,10ppm的混標(biāo),保證每kg肉中含1mg標(biāo)樣。分別加入30ml、20ml EDTA-Mallvaine緩沖液冰水浴中超聲10min后取出,3000r/min下離心5min,合并上清液,定容至50ml,離心,取上清液,混勻,待凈化。EDTA-Mallvaine緩沖液配制:取 307ml 0.1mol/L 檸檬酸溶液 和 193ml 0.5mol/L Na2HPO4混勻,再加入1.86g Na2 EDTA。 固相萃取小柱:InertSep PLS-2 20ml/265mg SPE方法:活化/平衡:10ml甲醇、10ml水、5ml Na2EDTA緩沖液上樣:50ml待測液過柱清洗:10 ml水小柱脫水干燥洗脫:10ml甲醇將洗脫液氮吹至干,用流動(dòng)相定容至1ml,過濾,待測。 2. 色譜分析同方法一 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 基質(zhì)加標(biāo)濃度為 1mg/kg,3次平行如下:
101.25%
6.9%
98.38%
7.9%
85.70%
7.7%
4. 島津技邇改進(jìn)的方法優(yōu)勢InertSep PLS-2 20ml/265mg 小柱規(guī)格大,不需要抽負(fù)壓即可自然滴落,操作更方便,且回收率高。
產(chǎn)品分類
HPLC色譜柱
GC色譜柱
樣品前處理
樣品瓶 進(jìn)樣針
針式過濾器 濾膜
化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品
儀器配件
儀器裝置
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